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流式抗体如何选择?

发表时间:2019-10-08

  第一看清楚抗的是你的目标蛋白质没错,目标蛋白的物种不要搞错了,有些抗体对好几个物种的目标蛋白有反应,对你的实验有没有影响。

  第二抗体的物种是小鼠,大鼠,兔子还是什么。虽然现在荧光都标记好了,一般不需要二抗。半泽直树说的以牙还牙十倍奉还。用日语和罗马,但最好还是选择你有匹配二抗的一抗,以备不时之需。如果抗体还能够做荧光染色啊,western blot啊用途多了更好。

  第三荧光的颜色选择一是你的流式仪一定要能读,二是跟你需要counterstain的其他流式抗体错开频率。

  第四抗体的球蛋白亚型。因为要根据这个选择isotype对照用抗体。其实严格来说不光亚型一样,浓度也要一样,每个抗体分子携带的荧光分子数量也要一样才行。最好是一个isotype你的好几个抗体都能用,就省了事了。

  第五到底能测试多少样品。有些产品介绍没说清楚,南方友谊商城重新开业 引入首家“会呼吸,可以根据推荐的浓度计算一下。一是这样才看出价格高低,二是根据自己需要选择大支还是小支.买多了过期也是浪费。

  当然也可以看看他们的克隆编号--有些文献会讨论某目标蛋白的各种抗体的特异性哪个好哪个坏,这都是使用者的经验。但一般买抗体没有人这么小心这么麻烦啦。

  你还可以看制作抗体所用的抗原是什么,有的是肿瘤组织提取液,有的是重组蛋白,有的是肽链片断。选用哪个跟你的实验用途有关。有些蛋白质有很多亚型,也要注意是否测试过跟那些亚型起反应。

  一个非常重要的忘记说,就是单抗还是多抗。也要根据实验性质选择。搜到一篇不错的文章谈这个问题你看下吧。


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